К проблеме повышения рабочей плодовитости производителей азовского калкана

Исследованы перспективы гормональной стимуляции созревания производителей азовского калкана. Показано, что внутримышечные инъекции суспензии ацетонированных гипофизов своего вида и синтетического аналога люлиберина сурфагона увеличивает количество и объем порций физиологически качественных половых продуктов самок и самцов. Кроме того, при ухудшении нерестовых условий (повышении температуры) гормональная обработка рыб способствует снижению скорости дегенеративных изменений в половых клетках, что дает возможность существенно расширить сроки нерестовой кампании.

В течение последних лет отмечается заметное снижение численности промысловой части популяции азовского калкана Scophthalmus maeoticus torosus=Psetta maeotica torosa (Rathke, 1837).
В сложившейся ситуации весьма актуальным является решение проблемы получения жизнестойкой молоди камбалы для пополнения естественных запасов и товарного выращивания.
В ЮгНИРО работы по разработке биотехнологии искусственного воспроизводства азовской камбалы калкан проводились в период с 1998 г. по 2008 г.
Производителей отбирали из промысловых уловов в юго-западной части Азовского моря в конце апреля – начале мая и перевозили на НИБ ЮгНИРО. Масса самок варьировала в пределах 0,6-2,2 кг, длина – 30-45 см, самцов, соответственно 0,4-1,2 кг и 25-39 см. Зрелые половые продукты получали двумя способами: с помощью регулирования температуры и гормонального инъецирования. В первом случае созревание икры проходило в условиях плавного повышения температуры воды с 12,5 до 16 °С.

В искусственных условиях от интактных рыб получали от 1 до 3-5 порций икры, их количество зависело от динамики температуры в нерестовый период, состояния половых клеток, а также от размера (возраста) рыб. Количество яиц в отдельных порциях варьировало от 13,75 до 200 тыс. шт., средняя рабочая плодовитость составляла 220 тыс. Повышение температуры воды до 18,5 °С в бассейнах, где содержались производители, приводило, как правило, к резкому снижению количества созревающих порций и их объема. Даже после кратковременного повышения температуры до 18-18,5 оС в ооцитах появлялись признаки дегенеративных изменений, впоследствии отмечалась тотальная резорбция как созревающих, так и желтковых клеток. Анализ самок, прекративших созревать интактно, показал, что в их гонадах содержится еще значительное количество желтковых ооцитов, ГСИ составлял 14-25,3 %.
Как показали исследования, наиболее полная реализация «основного запаса» ооцитов азовского калкана возможна при использовании гормонального стимулирования созревания производителей. Наибольшее количество икры было получено от самок, имевших яичники в IV стадии зрелости и получавших гормональные инъекции с первого дня экспериментов. Суммарная доза ацетонированного гипофиза своего вида, вызывавшая созревание, составляла 6-8 мг/кг.
Количество яиц в порциях увеличилось до 250 тыс. штук, а средняя плодовитость опытных рыб составила 675 тыс. Некоторое снижение икры в порциях рыб этой группы отмечалось после повышения температуры воды до 17-18 °С (рис. 1), однако оно не вызывало появления признаков резорбции ооцитов, а при снижении температуры до оптимальных, количество икры в порциях снова увеличивалось, в некоторых случаях до 110 тыс. шт.
Хорошие результаты получены при использовании в качестве индуктора созревания сурфагона в дозе 15-30 мкг/кг массы тела с интервалом 24-48 часов. Регулярное введение поддерживающих доз гормональных препаратов позволило получать порции зрелой икры до конца мая – начала июня.
В связи с малыми размерами семенников самцов азовского калкана (всего 2-20 г), для осеменения икры обычно используют их гомогенат. Однако в связи с резким падением численности камбалы, сложными условиями заготовки производителей, часто не удается заготовить необходимое количество самцов. В связи с этим на НИБ ЮгНИРО «Заветное» применяется метод многократного использования самцов для осеменения икры, получая эякуляты как от интактных, так и от обработанных гормональными препаратами рыб.
При гормональном инъецировании спермиации объем эякулята увеличивался до 2-3 мл, тогда как у интактных самцов азовского калкана его объем обычно составляет 0,7-1,0 мл. Исследования показали, что даже таким небольшим количеством эякулята от двух-трех самцов можно осеменить икру трех-четырех самок. При этом процент оплодотворения икры достигал 96%.
Высокая оплодотворяемость икры при относительно небольшом объеме эякулята у самцов камбалы обусловлена, вероятно, достаточно высокой концентрацией сперматозоидов и их способностью длительно (до 7-9 минут) сохранять поступательное движение в морской воде. Общая поступательная активность сперматозоидов наблюдалась в течение 240-360 сек. – у самых мелких самцов и до 420-570 сек. – у крупных (по 50%-ному тесту). Фаза вихревого движения сперматозоидов обычно продолжалась в течение 120 сек. (табл. 1)

 

Рисунок 1. Влияние температуры (Т, оС), солености (S) на плодовитость (Е, тыс. яиц) и число порций зрелой икры (N), полученных от самок (n=9) азовского калкана в экспериментальных условиях

В конце нерестового сезона (20-25 мая), когда температура воды в бассейнах с производителями повышалась до 19-20оС, созревание рыб прекращалось. В этот период у самцов отмечалось лишь поступательное (в течение 5-7 минут) и колебательное движение 50-10% спермиев.
Вихревая фаза отсутствовала. Как следует из данных таблицы, гормональная обработка позволяет несколько повысить качество половых продуктов самцов.

Таблица 1
Изменение некоторых характеристик половых продуктов самцов азовского калкана в течение эксперимента в нерегулируемых условиях

 

* После гормонального стимулирования спермиации.

Таким образом, применение гормональных препаратов для стимуляции созревания азовской камбалы повышает рабочую плодовитость самок за счет увеличения количества и объема порций зрелой физиологически качественной икры, способствует ослаблению повреждающего действия высокой температуры на созревающие половые клетки, что позволяет иметь репродуктивно зрелых самок и самцов в течение длительного периода. Это дает возможность продлить нерестовую кампанию и провести в искусственных условиях несколько туров нереста.

Л.И. Булли1, А.Ф. Булли2
1ФГБНУ ЮгНИРО, Керчь, Россия,
2ФГБОУ ВО КГМТУ, Керчь, Россия, Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.